过表达细胞系构建DNA/RNA提取试剂盒（吸附柱法）的主要检测方法-产品百科-seo学途外链网

过表达细胞系构建DNA/RNA提取试剂盒（吸附柱法）的主要检测方法

版块：产品百科类型：普通作者：ningxueqin 查看：100 回复：0 获赞：0 时间：2023-12-31 00:09:34

　DNA/RNA提取试剂盒（吸附柱法）可以从多种样本中提取DNA/RNA，包括血清、血浆、动物组织、体液等。处理的样本通过加入裂解液后，把混合物移至吸附柱中，之后可以通过洗涤、洗脱，即可分离出病毒DNA/RNA。本试剂盒提取的核酸可以用于Real-time PCR，Northern Blot，Blotting Hybridization ，cDNA library Construction等实验。
　　过表达细胞系构建检测方法：
　　一、样本前处理
　　动物、植物组织：将样本用生理盐水或PBS缓冲液充分研磨，离心取上清后进行样本提取操作。
　　血清、血浆、体液等样本：直接进行样本提取操作（不足200μL，可以加入PBS缓冲液或者生理盐水补足200μL）。
　　二、样本提取操作：
　　1.取200μL处理好的样本（不足200μL，可以加入PBS缓冲液或者生理盐水补足200μL），加入500μL裂解液，振荡30秒，室温静止2分钟。注：针对难裂解样本，室温静置时间可延长至5分钟。
　　2.把上述混合液转移到吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质，以免阻塞吸附膜），10000rpm离心1分钟，弃去套管中液体。
　　3.向吸附柱中加入500μL去蛋白漂洗液，12000rpm离心30秒，弃去套管中液体。
　　4.向吸附柱中加入500μL洗涤液，12000rpm离心30秒，弃去套管中液体。
　　5.向吸附柱中加入500μL洗涤液，12000rpm离心30秒，弃去套管中液体。
　　6. 12000rpm再次离心2分钟。
　　7.把吸附柱转移至新的1.5mL灭菌离心管中，向吸附柱中加入 50μL洗脱液，并于室温温育2分钟。
　　8.12000rpm离心1分钟，弃去吸附柱，1.5mL灭菌离心管中液体即为DNA/RNA溶液。提取的DNA/RNA可直接用于各种下游应用试验，如不立即使用，请于-80℃保存。

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